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1. 磷酸化糖代謝調(diào)節(jié)蛋白酶免elisa試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,,標準品孔各加不同濃度的標準品50μl;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μl,;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根---化物酶hrp標記的檢測抗體100μl,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液350μl,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次也可用洗板機洗板,。
6. 每孔加入底物a,、b各50μl,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μl,,15min內(nèi),,在450nm波長處測定各孔的od值。
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