細(xì)胞力學(xué)是現(xiàn)代生物學(xué)發(fā)展的領(lǐng)域,,涉及到載荷下細(xì)胞、細(xì)胞膜,、細(xì)胞骨架的形變,,彈性常數(shù)、黏彈性,、黏附力等力學(xué)性能的研究,;以及力學(xué)因素對(duì)細(xì)胞黏附、鋪展及生長(zhǎng),、分化等等生物學(xué)行為的影響,。細(xì)胞力學(xué)研究的基礎(chǔ)和關(guān)鍵是細(xì)胞加載技術(shù),。由于體內(nèi)環(huán)境異常復(fù)雜,;人體細(xì)胞的大小在十幾到幾十個(gè)微米之間,cellsoft報(bào)價(jià),,細(xì)胞膜的厚度僅有幾個(gè)納米到幾十個(gè)納米,,常規(guī)的宏觀力學(xué)加載方法和實(shí)驗(yàn)無法直接使用。因此,,體外分離細(xì)胞和建立合適的加載培養(yǎng)模型是細(xì)胞力學(xué)面臨的首要問題,。
1.用0.05%胰蛋白酶、胰蛋白酶-edta,、0.05%---膠原酶或其他方法從基質(zhì)中釋放細(xì)胞,。
2.向細(xì)胞中加入含的培養(yǎng)基以中和胰蛋白酶或膠原酶。
3.計(jì)算細(xì)胞數(shù)并確定所需細(xì)胞數(shù),,六安cellsoft,,6孔bioflex的每個(gè)孔約1.2 x 105個(gè)細(xì)胞? 培養(yǎng)皿。注:細(xì)胞接種密度因細(xì)胞類型而異,。我們建議測(cè)試細(xì)胞接種密度,,以確定應(yīng)用程序的佳細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞類型。
4.用培養(yǎng)基清洗細(xì)胞,,去除胰蛋白酶或膠原酶,。
5.將細(xì)胞重新懸浮在所選培養(yǎng)基中,并將其播種到每個(gè)孔中,。如果細(xì)胞會(huì)被拉伸,,我們建議在每個(gè)孔中放置3毫升培養(yǎng)基,大約每48-72小時(shí)更換一次培養(yǎng)基,cellsoft,,或者按照實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)組織培養(yǎng)方法,。需要注意的是,cellsoft代理,,只有附著的細(xì)胞才能承受均勻的應(yīng)變
當(dāng)膜處于完全拉伸位置時(shí),,安裝到裝載柱上的膜區(qū)域。因此,,
---flexcell細(xì)胞播種機(jī)將細(xì)胞接種到平板上? 設(shè)備,,僅在均勻應(yīng)變區(qū)域內(nèi),或僅在均勻應(yīng)變區(qū)域內(nèi)查看或測(cè)試單元,。要確定該面積,,可使用以下方程式:
直徑=裝載站直徑?) / (1+大伸長(zhǎng)率/100,
式中,,max%extension是您計(jì)劃在您的---中使用的大伸長(zhǎng)率,,diameter是膜中心圓的直徑。此圓以外的任何單元格都不會(huì)接收到均勻的牽張,。
細(xì)胞培養(yǎng)過程中對(duì)基質(zhì)硬度,、剪切應(yīng)力、機(jī)械應(yīng)變,、細(xì)胞形態(tài),、基底拓?fù)涞鹊牧W(xué)響應(yīng),影響細(xì)胞的存活,、增殖和分化(kureel et al.,, 2019, anderson et al.,, 2016; engler et al.,, 2006; gilbert et al., 2010; lutolf et al.,, 2009; murphy et al.,, 2014; winer et al., 2009; yeung et al.,, 2005). 這對(duì)于---應(yīng)用和基于細(xì)胞的是一個(gè)挑戰(zhàn),,因?yàn)樗鼈冃枰L(zhǎng)時(shí)間的擴(kuò)增和大批量的。
數(shù)據(jù)表明,,在軟2d基質(zhì)<1 kpa至5 kpa上生長(zhǎng)的各種類型的比在硬聚基質(zhì)上生長(zhǎng)的維持其表型的時(shí)間更長(zhǎng)
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