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薄層色譜,,分離后的物質(zhì)通過直接觀察,,或者染色處理后觀察,或者在紫外燈照射下觀察,。其中紫外照射熒光觀察是常用的方法,。但是薄層色譜法具有操作簡單、快速,,設(shè)備投資小,、檢測運行成本低等特點,在各領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
薄層色譜掃描儀是對薄層色譜進行定量檢測分析的儀器,,當(dāng)前市場上有兩類薄層色譜掃描儀,。
理想的顯色希望靈敏度高,斑點顏色穩(wěn)定,、斑點與背景間的對比度好,,斑點的大小及顏色的-與物質(zhì)的量成正比,在樣品組成并不完全已知的情況下,,通用顯色方法顯得尤為重要,,放射性薄層掃描儀生產(chǎn)廠家,通用顯色方法主要有:
1,、紫外照射法:方便,、不破壞樣品;
2,、碘蒸氣法:通用性強,,與紫外法結(jié)合靈敏度高于該兩法單獨使用;
3,、熒光試劑:制造熒光背景,,使原來紫外下無熒光物質(zhì)被鑒別,有熒光物質(zhì)更明顯,;
4,、---溶劑:對絕大多數(shù)有機物有效,,但有破壞性,。
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怎樣提高點樣效率,?
點樣是造成tlc定量誤差的主要來源。實驗證明:定量毛細管更適合較小體積的點樣,;微量注1射器更適合較大體積的點樣,。這主要是因為微量注1射器受小氣泡、溶液回爬現(xiàn)象的影響較大,。為避免不同定量毛細管理體制的占樣誤差,,建議一塊薄層板上用同一只定量毛細管。
在制備樣品時,,溶樣溶劑黏度不能過高,,以便于點樣;溶劑沸點過低則進樣體積易變,,過高則會改變展開劑組成,;對樣品溶解度過高會使樣點發(fā)生空心現(xiàn)象。-tlc樣點---一般為直徑3mm點間距離1-2cm底邊距離1.5cm;hplc樣點---一般為直徑1mm點間距5mm底邊距1cm,。
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