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在選擇c18反相分離柱時(shí),應(yīng)根據(jù)樣品情況,,改變流動(dòng)相的組成或溶劑強(qiáng)度,,以提高分離度、選擇性或保留時(shí)間,。
反相法c18在分離過程中,,水可以與水-甲1醇、水-乙1腈,、水----呋1喃等多種有機(jī)溶1劑混合,,而且分離效果也---。適當(dāng)?shù)母牧紕�,,如三�?胺或乙1酸,,可抑制硅膠表面殘余硅---的酸性,從而減少對(duì)酸或堿性組分的保留,,并減少拖尾,;同時(shí),對(duì)流動(dòng)相 ph值的調(diào)節(jié),,氧化鋁spe柱供應(yīng)商,,可---改變酸性或堿性組分的選擇性,。對(duì)酸性組分,流動(dòng)相 ph<7時(shí),,增加色譜柱的保留時(shí)間,;對(duì)堿性樣品,氧化鋁spe柱價(jià)格,,流動(dòng)相 ph***7時(shí),,將堿性組分分為游離型(rnh2),極性小,,保留時(shí)間增大,可在固定相和流動(dòng)相之間多次分布,,提高堿性組分的選擇性,。
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回收率
當(dāng)一個(gè)完整的 spe操作過程中,,目標(biāo)化合物可能會(huì)出現(xiàn)在出液、淋洗,、洗脫液或吸附劑中,,當(dāng)“目標(biāo)物不能回收或回收率低”現(xiàn)象出現(xiàn)時(shí),則向樣品溶液中加入標(biāo)液,,然后進(jìn)行一個(gè)完整的 spe操作,,分別收集出液、淋洗液和洗脫液并進(jìn)行分析,。
先確定目標(biāo)化合物存在于哪個(gè)部分,,然后確定問題來自以下哪個(gè)環(huán)節(jié):目標(biāo)化合物不能保留在吸附劑中;沒有完全洗脫,;其他環(huán)節(jié),。
目標(biāo)化合物在吸附劑中保留度不足
在樣品流出液或淋洗液中發(fā)現(xiàn)5%以上的目標(biāo)化合物時(shí),可得出“不能保留目標(biāo)化合物在吸附劑中”的結(jié)論,。
2.目標(biāo)化合物未完全洗脫
在樣本溶液流出液和淋洗液中沒有出現(xiàn)目標(biāo)化合物,,而在洗脫液中只出現(xiàn)少量或不出現(xiàn)目標(biāo)化合物,則判斷為“目標(biāo)物未完全洗脫”
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固相萃取術(shù)語(yǔ)通用:
吸附劑:固相萃取柱中的一種填料,,它能選擇性地從樣品溶液中萃取某些化合物;
吸收能力(capacity):一定的吸附劑,,在特定條件下,,能保持化合物的總(包括目標(biāo)化合物和部分干擾化合物)。
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固體萃取塔:固相萃取柱(solid phase extraction column,,簡(jiǎn)稱 spe柱)是由層析柱發(fā)展而來的樣品前處理設(shè)備,,用于萃取,、分離和濃縮。本發(fā)明主要用于各種食品,、農(nóng)畜產(chǎn)品,、環(huán)境和生物樣品中的樣品預(yù)處理。固相萃取技術(shù)已廣泛應(yīng)用于眾多(gb/t)和工業(yè)分析標(biāo)準(zhǔn),。
固相萃取柱的選擇必須考慮柱容量,。因?yàn)槲覀兠鎸?duì)的樣品基質(zhì)一般比較復(fù)雜,比如食物,,生物樣品等等,。固相萃取中,固相萃取吸附劑在吸附目標(biāo)化合物的同時(shí),,也吸附具有類似性質(zhì)的雜質(zhì),。所以,考慮柱容是指目標(biāo)化合物加可吸附的雜質(zhì)總量不能超過柱容,。結(jié)果表明,,當(dāng)載樣時(shí),部分目標(biāo)化合物可能無法被吸附,,從而降低了回收率,。
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在反相-固相萃取模式中,,溶劑體系的極性應(yīng)按樣品溶劑,、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞減,,而溶劑體系的洗脫強(qiáng)度應(yīng)逐漸增加,。要---所選的樣本溶劑不會(huì)洗脫目標(biāo)化合物,所選的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下,,很大限度地洗脫干擾物,,所選的洗脫劑應(yīng)能恰巧完全洗脫目標(biāo)化合物。
作用機(jī)理:在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標(biāo)化合物的極性---團(tuán)之間會(huì)產(chǎn)生極性作用力,。普通吸附劑極性力作用在色譜中通常稱為正相色譜吸附劑,。極性力比非極性力---,但比離子力更弱,。常用的極性基團(tuán)有---,,胺基,巰基等。由于非極性溶劑不能與極性固定相材料形成具有氫鍵的---團(tuán),,因此非極性基質(zhì)環(huán)境對(duì)吸附劑和目標(biāo)化合物之間的極性作用力是有利的,。結(jié)果表明,遼陽(yáng)氧化鋁spe柱,,在極性作用下,,樣品的固相萃取過程中,基質(zhì)主要是非極性的,,如正---,、---甲1烷、菜油等,,而目標(biāo)化合物中多含有極性大的---團(tuán),。
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含碳量
碳量是指填料的含碳量,,從側(cè)面反映了c18的修飾程度,在分離效果和目標(biāo)成分保持時(shí)間方面起著重要作用,。對(duì)于相同類型的填料,高碳柱上的非極性化合物比高碳柱上的碳含量高,,碳鏈增大,,同時(shí)也增加了結(jié)合相的非極性作用面積。c18碳含量由不同的鍵合工藝決定,,市場(chǎng)上c18碳含量一般在17-22%之間,,也有一些特殊c18碳含量超過22%,但低于14%的c18填料,。大部分樣本可以用普通碳含量的c18來解決,。而c18的含碳量也并非越多越好,根據(jù)樣品性質(zhì)和純化需要選擇不同含碳量的c18,,例如,,極性較大的化合物在高含碳量的c18中的保留程度不如低含碳量的c18。
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