低溫生物菌種——菌種分離方法介紹

孢子分離又可分為以下幾種方法：

( 1 褶上涂抹法：選取新鮮、健壯,、未開傘,、未裂破的子實體，洗凈后用75 %酒精表面滅菌2 分鐘,，然后連同培養(yǎng)基一起放入接種箱內,，經(jīng)熏蒸消毒12 ～ 24 小時，再按無菌操作技術將接種環(huán)在子實體菌褶上涂抹,，把涂抹后帶孢子的接種環(huán)在培養(yǎng)基上劃線接種,，后置于25 ～ 28 ℃恒溫箱內培養(yǎng)，可得純菌種,。

( 2 孢子印采集法：取滅過菌的載玻片,、試紙或黑布，置于新鮮,、未開傘或未開裂的子體菌褶的下方,。經(jīng)24 小時后，便落下孢子,，形成印痕即孢子印,。然后，用接種環(huán)或玻璃棒蘸取孢子,，接種在平面或斜面培養(yǎng)基上,，進行恒溫培養(yǎng)，可得純菌種,。

( 3 孢子收集器采集法：孢子收集器由玻璃鐘罩,、培養(yǎng)皿、三角架,、搪瓷盤等組成,。鐘罩下為一搪瓷盤，直徑25 厘米左右,，盤內先墊襯4～6 層紗布,，中央放1 副9 厘米直徑的培養(yǎng)皿，大蓋口朝下,，上放小的,，口向上。然后,，在上面小的培養(yǎng)皿上放1 只鉛絲繞成的三角架,，再將帶孔的玻璃鐘罩蓋上，頂上罩孔用棉塞塞好，用紗布包好整個孢子收集器,，置于高壓滅菌鍋或蒸籠內滅菌2小時,。

孢子收集器滅菌消毒后，放入無菌室或無菌箱內,。然后,，用小刀割取1 塊4～5 厘米大小的子實體，插在收集器內的三角架頂上若無孢子收集器,，也可用培養(yǎng)皿代替,。再置于溫度24 ～26 ℃下培養(yǎng)24 小時，水產(chǎn)養(yǎng)殖菌種價格,，培養(yǎng)皿中便可見到白---狀物,，此即為孢子。此時,，可將孢子收集器再移至接種箱內,，取出培養(yǎng)皿，水產(chǎn)養(yǎng)殖菌種種類,，蓋好,，并在培養(yǎng)皿內加入10 ～ 20 毫升的無菌水，使孢子散于本中,，成為孢子懸浮液,。然后，再用無菌---筒或吸管吸取孢子懸浮液,，接種于試管斜面培養(yǎng)基上,，每管注2 ～ 3 滴。置于24 ～ 26 ℃溫度下培養(yǎng)5 ～ 7 天,，培養(yǎng)基上便可長出白色菌落,。待菌落直徑有0 . 5 厘米時，選健壯的菌落,，再移接于另一試管的斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng),。當白色菌絲長滿試管時，便得純菌種,。