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博奧龍公司主要產(chǎn)品有抗0體制備全套產(chǎn)品,、---包裝相關(guān)產(chǎn)品,、2萬多種科研用抗原抗0體,、1200多種二抗,,涵蓋20多個物種和hrp、biotin,、fitc,、au、pe,、dylight,、alexa fluor、cy3、cy5,、 amca,、tritc、texa red等標(biāo)記二抗,;品類齊全的內(nèi)參標(biāo)簽抗0體,;另有wb、ihc,、elisa,、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑及諸多特色產(chǎn)品和特色技術(shù)服務(wù)。
注:
抗原注射以前需要收集一些正常血0清,,已備檢測抗0體時作為陰性對照,。待兔子在新環(huán)境中穩(wěn)定,大概需要四天左右時間,,可以進(jìn)行耳動脈取血,。取血量約5ml足矣。
免0疫用的抗原必須純化,,否則影響抗0體的,。抗原經(jīng)fca或fia充分乳化后才能注射,。將抗原液與佐劑等比例混合后,,置于混合器上使之劇烈振蕩使抗原充分乳化,乳化過程比較費時,、費力,,但若乳化不充分,會影響免0疫的效果,,振蕩后,,1000rpm離心一分鐘,,如水相和油相不分層即可注射,。首0次免0疫用fca,以后都用fia,。
免0疫方法可采用背部多點注射法,。即于家兔脊柱兩旁選4-6點皮下0注射,每點注0.1ml,,間隔2周后再于上述部位選不同點注射(不要選擇臨近位點,,否則---愈合不好),。每次免0疫的抗原量約100μg,。免0疫次數(shù)在四五次即可,,抗原用量大可以減少次數(shù)。
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多抗制備的概念:由多個b淋巴細(xì)胞克0隆所產(chǎn)生的,受到多種抗原決定簇---并可與多種抗原表位結(jié)合的抗0體,。多抗制備主要包括以下幾個步驟:免0疫動物,、佐劑、免0疫原,、免0疫、取血等,。
多抗制備的制備步驟
一,、器材
剪刀(剪兔毛用)一把,、彎頭眼0科手術(shù)鑷子(游離血管用)一把、直頭眼0科手術(shù)剪(剪血管用)一把,,手術(shù)刀架,,手術(shù)刀片,注0射器(1ml,、10ml,,山羊抗人igg fab,25ml)附針頭,,兔子固定架,,滅菌三角燒瓶(200ml)或平皿(直徑18cm)、彎頭止血鉗四把,,直頭止血鉗兩把,,手術(shù)-,塑料放血管,,紗布等,。
二、試劑
生理鹽水
弗氏完全佐劑
弗氏不完全佐劑
二甲0---,,酒精棉,,脫脂棉,2% nan3
三,、免0疫原:蛋白或klh偶聯(lián)的多肽,。每次免0疫100-200μg免0疫原。
四,、兔子的選擇
兔子的重量應(yīng)在四斤以上,,兩耳光滑,明顯可見耳靜,、動脈,,健康。
五,、免0疫
用生理鹽水稀釋免0疫原,,然后與相應(yīng)的佐劑進(jìn)行1:1混合�,?乖妥魟┩耆旌闲纬煞(wěn)定的乳劑,,將該乳劑在兔子雙肩周圍的皮膚下進(jìn)行皮下0注射和后大腿進(jìn)行肌肉注射。每個區(qū)域大約用1/4的免0疫原,。這樣免0疫原可以---存在從而提高免0疫應(yīng)答,。
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在---,、和組織液里的抗0體主要是igm和igg,。在正常血漿中,igm約占血漿內(nèi)總抗0體量的10%,。igm的殺菌,、溶菌、促進(jìn)吞噬作用及凝集抗原的作用都比igg強,,它也能中和---外和阻止---,。人若缺乏igm,可能引起致死性的,。igg占血漿內(nèi)抗0體總量的70%~0%,,由于它的分子量較小,通透性大,,所以在體內(nèi)分布,。它能進(jìn)入組織液和腦脊液內(nèi);并能通過進(jìn)入胎兒體內(nèi),。iga具有明顯的和抗---作用,,分泌型的iga存在外分泌物中,,如初乳、淚液,、唾液,、膽汁以及---道、呼吸道和尿,、生殖道的粘膜分泌液中,。而且,---中的,,iga也能在里形成大量分泌型iga,,由膽汁排人十二指腸,構(gòu)成外界物質(zhì)通向體內(nèi)的道防線,,阻止上述管腔內(nèi)的抗原物質(zhì)在管壁附著,。因此,iga是抗粘膜的一個重要抗0體,,使整個內(nèi)臟的功能都能得到增強,。
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