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博奧龍公司主要產(chǎn)品有抗0體制備全套產(chǎn)品、---包裝相關(guān)產(chǎn)品,、2萬(wàn)多種科研用抗原抗0體,、1200多種二抗,涵蓋20多個(gè)物種和hrp,、biotin,、fitc、au,、pe,、dylight、alexa fluor,、cy3,、cy5、 amca,、tritc,、texa red等標(biāo)記二抗;品類齊全的內(nèi)參標(biāo)簽抗0體,;另有wb,、ihc、elisa,、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑及諸多特色產(chǎn)品和特色技術(shù)服務(wù),。
單克0隆抗0體單抗制備制備過(guò)程有以下幾個(gè)步驟:
步驟一:細(xì)胞免0疫
免0疫動(dòng)物免0疫動(dòng)物是用目的抗原免0疫小鼠,,使小鼠產(chǎn)生致敏b淋巴細(xì)胞的過(guò)程,。 一般選用6-8周齡雌性balb/c小鼠,按照預(yù)先制定的免0疫方案進(jìn)行免0疫。 抗原通過(guò)---循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免0疫器0官,,---相應(yīng)b淋巴細(xì)胞克0隆,,使其活化、增殖,,并分化成為致敏b淋巴細(xì)胞,。
步驟二:細(xì)胞融合
采用眼球摘除放血法處死小鼠,無(wú)菌操作取出脾0臟,,在平皿內(nèi)擠壓研磨,,制備脾細(xì)胞懸液。 將準(zhǔn)備好的同系骨0髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合,,并加入促融合劑聚乙 二醇,。在聚乙 二醇作用下,各種淋巴細(xì)胞可與骨0髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合,,形成雜交瘤細(xì)胞,。
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product_name:山羊抗人igg?fab
category:抗原抗0體
concentration:見管體標(biāo)簽
純化方法:特異親和純化
批號(hào)和有效期:見管體標(biāo)簽
稀釋液/緩沖液:0.01m pbs,ph7.4
使用濃度:optimal concentrati0ns should be determined by the end user
運(yùn)輸及保存條件:4℃運(yùn)輸,,-20℃避光保存
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取血:
免0疫一周后,,可以耳動(dòng)脈取血檢測(cè)抗0體效價(jià),。因?yàn)槠鸪鯉状蚊?疫產(chǎn)生的抗0體的效價(jià)比較低,頭兩次取血,,夠檢測(cè)用即可,。在三次免0疫后,可以獲得較高0效價(jià)的抗0體,,每次取血量可以在40ml,,不要取太多,否則會(huì)造成兔子貧0血,。
前幾次取血用19號(hào)針頭對(duì)兔子進(jìn)行耳動(dòng)脈取血,,室溫過(guò)夜析出血0清,。
zui后一次取血可以采用頸動(dòng)脈放血,具體操作如下:
1,、家兔仰臥于兔架上固定頭部,,用紗布固定四肢,。頭部略放低以暴露頸部,。剃毛并消毒皮膚。
2,、沿頸部中線用手術(shù)刀切開皮膚約10cm,,分離皮下結(jié)締組織,直至暴露出氣管兩側(cè)的胸鎖乳突肌(小心操作,,如碰到小血管出血,,可用止血鉗止血)。
3,、用直頭止血鉗分離胸鎖乳突肌與氣管間的頸三角區(qū)疏松組織,,暴露出頸總動(dòng)脈后用彎頭眼0科鑷使之游離,剝離神經(jīng)和結(jié)締組織,。
4,、于動(dòng)脈下套入兩根黑絲線,分別置于遠(yuǎn)心及近心端,。結(jié)扎遠(yuǎn)心端的絲線,。近心端的動(dòng)脈用血管夾夾住。
5,、用小拇指墊在血管下,,用尖頭眼0科手術(shù)剪在兩根絲線間的動(dòng)脈璧上剪一小口(勿剪斷),插入塑料放血管,。再將近心端的絲線結(jié)扎固定于放血管上,,以防放血管滑脫。
6,、松開止血鉗,,使---流入容器中。一般一只家兔可放血100-120ml,。
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