上海莼試實業(yè)有限公司為您提供豬食欲素/阿立新b(ox-b)elisa試劑盒。豬食欲素/阿立新b(ox-b)elisa試劑盒操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,，在di一,、第二孔中分別加標準品100μl，然后在di一,、第二孔中加標準品稀釋液50μl,，混勻,；然后從di一孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三,、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,，再各取50μl分別加到第五,、第六孔中，再在第五,、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,，混勻；混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中，再在第七,、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。稀釋后各孔加樣量都為50μl,，濃度分別為180 ng/l，120 ng/l ,，60 ng/l,，30 ng/,，15 ng/l。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同,、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl樣品終稀釋度為5倍,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將3048t的20倍倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048t的20倍倍稀釋后備用,。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑a50μl,，再加入顯色劑b50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)此時藍色立轉(zhuǎn)黃色,。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度od值,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘,。

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