上海谷研實(shí)業(yè)有限公司為您提供猴-白helisa試劑盒說明書,。產(chǎn)品名稱
猴-白h elisa試劑盒說明書
英文名稱
monkey hbh (hemoglobin h) elisa kit
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司為您提供猴-白helisa試劑盒規(guī)格,。
優(yōu)點(diǎn):
1.進(jìn)口抗體----,、靈敏,、特異
2.操作----吸附均勻,,吸附性好,,空白值低,,孔底透明度高
3.的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,---性強(qiáng)
4.購買本公司的elisa試劑盒,,免費(fèi)代測
5.技術(shù)服務(wù)要求:,,規(guī)范,
6.適用于---,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等多種類型的樣本
7.可檢測動物類型豐富:人、猴,、大鼠,、小鼠、---,、黃金地鼠,、兔、豬,、犬,、牛、綿羊,、山羊,、鵝、雞,、蝦,、河蟹、鱸魚,、斑馬魚等
8.可檢測指標(biāo)齊全:---因子,、血管生成素、動脈粥樣硬化因子,、趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9.經(jīng)濟(jì),、實(shí)惠,、---,完善,、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,,的科研隊(duì)伍,的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,、準(zhǔn)確---的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oc),,試劑不能直接在37oc溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/ml,。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的ep管,,每個ep管中加入150μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度,, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/ml)直接作為空白孔,。為---實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
3. 濃洗滌液:用580ml蒸餾水或去離子水將20ml濃洗滌液稀釋至600ml,,進(jìn)行30倍稀釋。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
elisa試劑盒液體樣本:包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1血清
室溫---自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分,。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
2血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇edta、檸檬酸鈉或---作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
3尿液:
用無菌管收集,。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分,。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行,。
4細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),,用無菌管收集。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分,。仔細(xì)收集上清,。
5培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用pbsph7.2-7.4稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分,。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
6組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,,稱取重量。加入一定量的pbs,,ph7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的pbsph7.4,,或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右2000-3000轉(zhuǎn)/分,。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用,。
注意事項(xiàng):
1加樣:
實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),,可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差,;
加酶試劑后,,用吸水紙吸干孔外試劑;
作定量試驗(yàn)時(shí),,使用加樣器加注試劑,,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,,要做到一份樣本一個移液頭,,防止交叉污染。
2.溫育:
如有兩種溫度,,盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應(yīng)時(shí)間的條件;
用1個小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察,;
96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,,因此盡量采用水浴,;
3.洗板:
手工洗板時(shí),,拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,,用力不能過猛,,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用-針頭挑出,;
為了洗滌效果好,,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù),;
實(shí)驗(yàn)流程:
猴-白h elisa試劑盒1.實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品,、試劑及樣本的準(zhǔn)備,;
2.加樣標(biāo)準(zhǔn)品及樣本50μl,37℃孵育30分鐘,;
3.洗板5次,,加酶標(biāo)試劑50ul,37℃孵育半小時(shí),;
4.洗板5次,;加入顯色液a,b各50ul,37℃孵育顯色15分鐘
5.加終止液50μl,,立即450nm讀數(shù),。
6.計(jì)算
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