上海谷研實業(yè)有限公司為您提供兔-羥化酶elisa試劑盒說明書,。產(chǎn)品全稱:兔---β羥化酶 elisa試劑盒說明書
英文簡稱:rabbit dβh (dopamine-β-hydroxylase) elisa kit
貨號:goy-r6369
規(guī)格:48t/98t
服務(wù):可提供免費代測服務(wù),,以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等
保存環(huán)境:2-8℃低溫,、避光,、防潮
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..需要而未提供
公司“是企業(yè)是生命之源”,,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——,、靈敏,、特異
2操作——吸附均勻,、吸附性好、空白值低,、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高,、---性強
4適用于---、組織勻漿,,細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等各種類型的樣本,。
5可檢測指標齊全:生長因子、---因子,、脂肪因子,、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心酶標免疫分析法測定標本中aif水平。用純化的抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗體,、hrp標記的親和素,,經(jīng)過---洗滌后用底物tmb顯色。tmb在---化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的aif呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度od值,,計算樣品濃度,。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔,。
2,、標準品standard:2瓶凍干品。
3,、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶,。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶,。
5,、辣根---化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6,、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7,、辣根---化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶,。
9,、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10,、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
操作流程:
1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,,每種樣品設(shè)3個平行孔,;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl,;另設(shè)一個空白對照孔,,加入純細胞裂解液100μl,。
2酶標板置4℃,包被過夜,。
3洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,,用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,,之后將洗滌液注滿板孔,,浸泡1-2分鐘,間歇搖動,。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl,。
5酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min,。
6洗板,,同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl,。
8酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min。
9洗板,,同4,。
10每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,,置37℃暗處反應(yīng)15-20min,。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應(yīng)。
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