離子交換層析:
離子交換層析分離蛋白質(zhì)是根據(jù)在一定ph 條件下,,蛋白質(zhì)所帶電荷不同而進行的分離方法,。常用于蛋白質(zhì)分離的離子交換劑有弱酸型的羧纖維素(cm纖維素) 和弱堿型的二-纖維素(deae纖維素)。前者為陽離子交換劑,,后者為陰離子交換劑,。
疏水層析:
疏水層析原理:蛋白質(zhì)表面一般有疏水與親水基團,疏水層析是利用蛋白質(zhì)表面某一部分具有疏水性,,與帶有疏水性的載體在高鹽濃度時結(jié)合,。在洗脫時,將鹽濃度逐漸降低,,因其疏水性不同而逐個地先后被洗脫而純化,,可用于分離其它方法不易純化的蛋白質(zhì)。
疏水性:非極性化合物如-,、在水中的溶解度非常小,,生物制品層析系統(tǒng)哪個穩(wěn)定性好,,與水混合時會形成互不相溶的兩相,,即非極性分子有離開水相進入非極性相的趨勢,即疏水性
鹽能增強疏水作用:蛋白質(zhì)局部的可逆變性
不同層析液的成分不同,。主要有以下五種
1,、20份60℃-90℃下分餾出來的、2份,、1份-混合而成的層析液,。
2、9份體積分數(shù)為95%的酒精和1份-混合而成的層析液,。
3,、或加少許鈉混合而成的層析液。
4,、體積分數(shù)為95%的酒精組成的層析液,。
5、92號組成的層析液,。
層析液的作用
層析液的作用是溶解樣品,,作為樣品的載體。溶解度大的物質(zhì)在濾紙上擴散得快,離液面較遠,;溶解度小的物質(zhì)在濾紙上擴散的慢,,離液面較近。
在生物“葉綠素提取和分離”實驗中,,生物制品層析系統(tǒng)報價,,使用的層析液是用于分離葉綠體中的不同色素的。
需做效價測定:對于生物制品有效成分的檢測,生物制品層析系統(tǒng),,除應(yīng)有一般化學(xué)方法或理化分心進行有效成分含量測定外,,更應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的特異生理效應(yīng)或?qū)R换磻?yīng)擬定其專屬性的生物效價測定方法,以表征其所含生物活性成分的含量,。
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