上海酶聯(lián)生物科技有限公司為您提供人腎透明細胞xianai細胞,。
細胞名稱: ---c crl-1932(786-o)細胞, 786-o細胞, 786o細胞,人腎透明細胞xian ai細胞
種屬來源: 人
組織來源: 腎
特 征: 腎細胞xian ai
細胞形態(tài): 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
培 養(yǎng) 基: rpmi-1640,,90%;fbs,,10%,。
生長條件: 氣相:空氣,95%,;---,,5%; 溫度:37 ℃,
傳代方法: 1:2至1:6,每周2次,。
凍存條件: 90% 完全培養(yǎng)基+10% dmso,,液氮儲存
支原體檢測: 陰性
安全等級: 1
應 用: 該細胞可以作為轉染宿主細胞。
str:
amelogenin: x,y
csf1po: 10
d13s317: 8
d16s539: 12
d5s818: 9
d7s820: 11,12
tho1: 6,9.3
tpox: 8,11
vwa: 15,17
特點和簡介
此細胞源自一個原發(fā)性透明細胞癌,。 此細胞有微絨毛和橋粒,,能在軟瓊脂是生長。 此細胞生成的一個pth樣的多肽與乳ai和fei ai中的肽相似,。 這個多肽的n端與pth相似,活性與pth相似,,分子量為6000道爾頓,。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過str檢測,。此細胞源自一個原發(fā)性透明細胞癌,。 此細胞有微絨毛和橋粒,能在軟瓊脂是生長,。 此細胞生成的一個pth樣的多肽與乳ai和fei ai中的肽相似,。 這個多肽的n端與pth相似,活性與pth相似,,分子量為6000道爾頓,。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過str檢測,。
接受后處理
1) 收到細胞后,,請檢查是否漏液 ,如果漏液,,請拍照片發(fā)給我們,。
2) 請先在顯微鏡下確認人腎透明細胞xian ai細胞生長 狀態(tài),去掉封口膜并將t25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3) 棄去t25瓶中的培養(yǎng)基,,添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基,。
5) 接到細胞次日,,請檢查細胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或---污染,,請及時與我們取得聯(lián) 系,。
培養(yǎng)操作
1復蘇細胞:將含有 1ml 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4ml 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000rpm 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補 加 1-2ml 培養(yǎng)基后吹勻,。然 后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng) 過夜,。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2細胞傳代:如果人腎透明細胞xian ai細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。 1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 pbs 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml ---液0.25%trypsin-0.53mm edta于培養(yǎng)瓶 中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中--- 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞---情況,,若細胞大部分 變圓并脫落 ,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000rpm 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,補加 1-2ml 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中 或者瓶中,。
3細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)---時,可進行細胞凍存,。下面 t25 瓶為類,;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,pbs 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止---,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細胞, 根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 dmso,,輕輕混勻,,dmso 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,,每支凍 存管凍存 1ml 細胞懸液,,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80 度冰箱,,2 個小時 以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,,若有上述 現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系,。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,,如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基、血清比例,、 所 需細胞因子 等,,---細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問 題,,責任由客戶 自行承擔,。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題貼壁細 胞會有少量 從瓶 壁脫落,,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼 壁,,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮 培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng),;如果染色結果顯示細胞無活 力,,請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)?您再免費寄送一次,。
4. 靜置細胞貼壁后,,請將細胞瓶內的培養(yǎng)基倒出,,留 6~8ml 維持細胞正常培 養(yǎng),待細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代,。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng),。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用,細 胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件,。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),,便于和我司技術 部 溝通交流,。由于運輸?shù)脑颍瑐別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián) 系 ,,告知細胞的具體情況,以便我們 的------回訪直至問題解決,。
7. 該細胞僅供科研使用,。
聯(lián)系時請說明是在云商網(wǎng)上看到的此信息,謝謝,!
聯(lián)系電話:021-54222852,,13524933993,歡迎您的來電咨詢,!
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