上海酶聯(lián)生物科技有限公司為您提供人zigong內(nèi)膜ai細胞,。

細胞名稱:         ---c crl-1671(rl95-2)細胞,rl95-2細胞,rl952細胞,
種屬來源:         人
組織來源:         zi gong
特      征:         zi gong內(nèi)膜ai
細胞形態(tài):         上皮細胞樣
生長特性:         貼壁生長
培 養(yǎng) 基:         d-mem/f-12培養(yǎng)基,，90%；fbs,，10%,。
生長條件:         氣相：空氣,，95%,；---，5%; 溫度：37  ℃,
傳代方法:         1：2至1：6,，每周2次,。
凍存條件:         90% 完全培養(yǎng)基+10% dmso，液氮儲存
支原體檢測:         陰性
安全等級:         1
str:
amelogenin: x
csf1po: 10,11
d13s317: 8,12
d16s539: 11,13
d5s818: 10,11
d7s820: 10
tho1: 9,9.3
tpox: 8
vwa: 16,20

特點和簡介
這些細胞有α角蛋白,，定義明確的連接復(fù)合體,，張力絲和表面微絨毛。 在本庫通過支原體檢測,。 在本庫通過str檢測,。

接受后處理
1) 收到細胞后，請檢查是否漏液 ,，如果漏液,，請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認人zi gong內(nèi)膜ai細胞生長 狀態(tài),，去掉封口膜并將t25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3) 棄去t25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基,。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基。
5) 接到細胞次日,，請檢查細胞是 否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或---污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián) 系,。


培養(yǎng)操作
1復(fù)蘇細胞：將含有 1ml 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4ml 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000rpm 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2ml 培養(yǎng)基后吹勻。然 后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng) 過夜。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2細胞傳代：如果人zi gong內(nèi)膜ai細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。     


1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 pbs 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml ---液0.25%trypsin-0.53mm edta于培養(yǎng)瓶 中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中--- 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞---情況,，若細胞大部分 變圓并脫落 ，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000rpm 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2ml 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中 或者瓶中,。
3細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)---時，可進行細胞凍存,。下面 t25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，pbs 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止---,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,， 根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 dmso,，輕輕混勻，dmso 終濃度為 10%,，細胞密度不低于1x106/ml,，每支凍 存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80 度冰箱，2 個小時 以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。



培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象，若有上述 現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系,。
2. 仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、 所 需細胞因子 等，---細胞培養(yǎng)條件一致,。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問 題,，責(zé)任由客戶 自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題貼壁細 胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察,。此時多數(shù)細胞均 會貼 壁,，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常,， 請將細胞離心后用新鮮 培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng),；如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,，信息確認后我們?yōu)?您再免費寄送一次,。
4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,，留 6~8ml 維持細胞正常培 養(yǎng),，待細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng),。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,，細 胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件,。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù) 部 溝通交流,。由于運輸?shù)脑���,，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系 ,，告知細胞的具體情況,，以便我們 的------回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用,。

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