上海酶聯(lián)生物科技有限公司為您提供人原髓細(xì)胞baixuebing細(xì)胞,。

細(xì)胞名稱:      ---c ccl-240(hl-60)細(xì)胞,hl-60細(xì)胞,hl60細(xì)胞,人原髓細(xì)胞bai xue bing細(xì)胞
種屬來源:      人
組織來源:      外周血,；早幼粒細(xì)胞
特      征:      ji xing粒－單核細(xì)胞bai xue bing
細(xì)胞形態(tài):      原粒細(xì)胞
培 養(yǎng) 基:      imdm培養(yǎng)基，80%；fbs,，20%。
生長條件:      氣相：空氣,，95%,；---，5%; 溫度：37  ℃,
傳代方法:      1：2至1：6,，每周2次,。
凍存條件:      90% 完全培養(yǎng)基+10% dmso，液氮儲(chǔ)存
支原體檢測:      陰性
安全等級:      1
應(yīng)     用:      該細(xì)胞可以作為轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞,。
str:
d5s818: 12
d13s317: 8,11
d7s820: 11,12
d16s539: 11
vwa: 16
tho1: 7,8
amelogenin: x
tpox: 8,11
csf1po: 13,14
同工酶:
ak-1, 1
es-d, 1
g6pd, b
glo-i, 1
me-2, 1
pgm1, 1
pgm3, 1
備注:
nucleotide (genbank) : m62505 human c--- anaphylatoxin receptor mrna, complete cds.
nucleotide (genbank) : nm_001736 homo sapiens complement component 5 receptor 1 (c--- ligand) (c5r1), mrna.

特點(diǎn)和簡介
hl-60是一株早幼粒細(xì)胞,。 外周血白細(xì)胞來自一位患有ji xing粒-單核細(xì)胞bai xue bing的36歲白人女性。 hl-60 自發(fā)分化,，---鹽,、次黃嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(pma,tpa),、dmso(1% to 1.5%),、fang xian jun素d和視黃酸可以促進(jìn)分化。 細(xì)胞表現(xiàn)出吞噬活性,，并對趨化ci ji有響應(yīng),。zhi ai基因myc表達(dá)陽性。 在本庫通過支原體檢測,。 在本庫通過str檢測,。


接受后處理
1) 收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液 ,，如果漏液,，請拍照片發(fā)給我們,。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)人原髓細(xì)胞bai xue bing細(xì)胞生長 狀態(tài)，去掉封口膜并將t25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3) 棄去t25瓶中的培養(yǎng)基,，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基,。
5) 接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是 否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或---污染,，請及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián) 系。


培養(yǎng)操作
1復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1ml 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4ml 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000rpm 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2ml 培養(yǎng)基后吹勻,。然 后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng) 過夜,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2細(xì)胞傳代：如果人原髓細(xì)胞bai xue bing細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。        1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 pbs 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml ---液0.25%trypsin-0.53mm edta于培養(yǎng)瓶 中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中--- 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞---情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落 ,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000rpm 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2ml 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中 或者瓶中。
3細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)---時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 t25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，pbs 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止---,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,， 根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 dmso,，輕輕混勻，dmso 終濃度為 10%,，細(xì)胞密度不低于1x106/ml,，每支凍 存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí) 以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。




注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,，若有上述 現(xiàn) 象發(fā)生請及 時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、 所 需細(xì)胞因子 等，---細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題,，責(zé)任由客戶 自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì) 胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察,。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼 壁,，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請將細(xì)胞離心后用新鮮 培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng),；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力,，請拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)?您再免費(fèi)寄送一次,。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后,，請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8ml 維持細(xì)胞正常培 養(yǎng),，待細(xì) 胞匯 合度  80%左右時(shí)正常傳代,。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,，細(xì) 胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和我司 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑���,，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時(shí)和我們聯(lián) 系 ，告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們 的------回訪直至問題解決,。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

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